诸葛亮三气周瑜的故事中，假戏真做发生在第三气。

第一气

情节：周瑜和诸葛亮约定，如果周瑜夺取南郡失败，刘备再去取。周瑜第一次夺取失利受伤，然后又将计就计，打败了曹兵，但诸葛亮却乘机夺取了南郡等地，既没有违约，又夺取了地盘。

回目：第五十一回。

第二气

情节：周瑜设计想在让孙尚香嫁给刘备的时候杀掉刘备，但被诸葛亮识破，结果“赔了夫人又折兵”。

回目：第五十五回。

第三气

情节：周瑜主动向刘备邀请，想要讨还荆州，但被诸葛亮识破，周瑜一怒之下，再加上原来的旧伤，不治身亡。

回目：第五十六回。

因此，诸葛亮三气周瑜中假戏真做发生在 第三气，即第五十六回。